22．（12分）临床调查发现部分癌症患者的癌细胞中存在着携带原癌基因的ecDNA（由于染色体断裂和重新连接，形成游离于染色体外的环状DNA分子）。Cre酶可以将DNA上两个相同loxP位点之间的片段切割后环化，作用原理如图1所示。为构建与癌细胞中类似的ecDNA用于研究。研究者将片段1和片段2（两段均为含loxP位点和标记基因的外源DNA）插入小鼠细胞的12号染色体，再用Cre酶处理，构建了含原癌基因MDM2的ecDNA的细胞模型，过程如图2所示。
（1）常用___________处理培养小鼠细胞使其分散成单个细胞进行培养，培养这些细胞的气体环境为___________。
（2）将片段1和片段2导入小鼠细胞最常用的方法是___________，若想筛选出同时导入片段1和片段2的细胞可在培养基中添加___________。图2中插入小鼠细胞12号染色体上的片段2的组成元件从左向右依次为___________
①潮霉素抗性基因 ②嘌呤霉素抗性基因
③红色荧光蛋白基因 ④绿色荧光蛋白基因上游序列
⑤绿色荧光蛋白基因下游序列 ⑥loxP位点
（3）ec细胞分裂时，复制后的ecDNA随机分配给两个子细胞，ecDNA不能像染色体DNA一样平均分配的原因可能是自身缺少___________（结构）。用荧光显微镜观察分裂产生的子细胞，观察到___________（现象）的为丢失ecDNA的子细胞。子代ec细胞中ecDNA拷贝数增加可能会导致___________，从而使细胞癌变。培养过程中，为使子代中ec细胞比例增加，可在培养液中加入___________。
